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細胞培養常用設備及實驗技巧(二)無菌操作

無菌室的滅菌:

1.定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%過氧乙酸擦拭。

2.CO2孵箱(培養箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%過氧乙酸,再用紫外燈照射。

3.實驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統各20~30分鐘。

4.實驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺。

實驗人員的無菌準備:

1.肥皂洗手。

2.穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋 。

3.用75%酒精棉球擦凈雙手。

無菌操作的演示:

1.凡是帶入超凈工作臺內的酒精、PBS、培養基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面 。

2.靠近酒精燈火焰操作。

3.器皿使用前必須過火滅菌。

4.繼續使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處,使用時仍要過火。

5.各種操作要靠近酒精燈,動作要輕、準確,不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。

6.吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管,防止交叉污染。

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